1.試樣消煮。精密稱取混合均勻的牛奶樣品5.0 g(約25.0 mg氮，稱樣量不能太大，否則易起大量泡沫)，精確至0.1 mg;小心放入消煮管，避免試樣附著在管壁;加入混合催化劑5.0 g，與試樣混合均勻;再加入12 mL和2~5 mL的雙氧水(牛奶脂肪含量高，在消煮前期極易起泡沫且泡沫不易消失，泡沫易粘附于管壁而影響結果的準確性;加入雙氧水起消泡作用，且易使溶液澄清透明，可縮短消煮時間);420e加熱至液體呈透亮的藍綠色后，繼續加熱至少1 h;消煮好后關閉熱源讓其自然降溫。

2.蒸餾。向接受瓶內加入10 mL硼吸收液和3滴混合指示劑，使冷凝管末端浸入硼吸收液，蒸餾4 min；最后用蒸餾水沖洗凱氏定氮儀冷凝管末端，洗液并入蒸餾液。

3.滴定。蒸餾結束后蒸餾液立即用鹽標準溶液滴定，滴定至溶液由藍綠色變為灰紅色，并同時做試劑空白對照。